在我們免疫比濁試劑開發過程中，你們有沒有遇到這樣的問題：“高值區分度比較大時，低端就區分不開；高端區分度比較大不開時，低端卻區分的比較明顯”今天帶著這個問題和大家探討一下聚乙二醇(PEG)對免疫比濁試劑是如何影響的。

在標記微球和樣本反應時，我們需要提前準備好反應環境，這里的反應環境就是我們通常說的R1試劑，沒有R1試劑的參與，整個反應將會一塌糊涂，或者說根本不行！

在R1試劑中主要包括這幾個部分，包括緩沖液、離子、防腐劑、穩定劑、PEG,有的時間也會添加阻斷劑在里面，PEG在這里面起著關鍵作用，用量的多少直接影響著抗原抗體反應的成敗！PEG無毒、無刺激性，具有良好的水溶性，并與許多有機物組份有良好的相溶性。它們具有優良的潤滑性、保濕性、分散性、粘接劑、抗靜電劑及柔軟劑等，它在免疫比濁(zhuo)法中對抗(kang)原(yuan)抗(kang)體反應有顯(xian)著影響，主(zhu)要體現(xian)在以下幾個(ge)方面：

1、增加試劑靈敏

PEG可以加快反應速度，穩定抗原-抗體復合物。在反應體系中加入適量的PEG（通常濃度為3% ~ 4%），可以提高檢測信號的強度和靈敏度。PEG能夠增加某些抗原的溶解性，從而促進抗原與抗體之間的結合，增強免疫反應的靈敏度。PEG可以用于將多個抗原連接在一起，形成多價結構，從而增強特異性和親和力，促進更強烈的免疫反應。PEG修飾的(de)抗(kang)原或抗(kang)體往往具有更好的(de)穩(wen)定性，這對于長期(qi)儲存(cun)或在復(fu)雜生物(wu)環境中檢測(ce)時尤(you)為重要。

這里要特別(bie)注意：當濃度非常低時，不同濃度的校準品將(jiang)檢(jian)測出的光(guang)電值幾乎一樣；濃度升高時，不同濃度的校準品將檢測出的光電值有所不同(這時候高端區分比較明顯，低端區分不太明顯）；隨著濃度越來越高，高(gao)端區(qu)分慢慢變得不(bu)明顯比(bi)(bi)較明，而(er)低端區(qu)分變的比(bi)(bi)較明顯。

2、防止非特異性沉淀

通常PEG的分子量較大，可以有效防止血清、血漿中其他蛋白質（如IgM、α2巨球蛋白、脂蛋白）非特異性沉淀，避免形成“偽濁度”，影響準確性和空白限。PEG的空(kong)間(jian)位阻效應可以減少抗體與其他大分子或細胞表面的非特異性結合，提高信號的特異性和準確性。

3、維持抗體過量

在抗原過量的情況下，PEG可以促進抗原-抗體復合物的形成，避免光散射減少，從而保持較高的濁度。

適用的pH值范(fan)圍：

PEG的(de)使(shi)用(yong)需要確保反應液(ye)的(de)pH值(zhi)在6.5~8.5之(zhi)間(jian)，以形成穩定(ding)的(de)復合(he)物。

操作注意事項：

在使用PEG時，需(xu)要注意其濃度不(bu)宜(yi)過(guo)高，否則可能會(hui)導致(zhi)非特異(yi)性聚集和微球自身凝聚，影響測定(ding)結果的(de)準確(que)性。

總結來說，PEG通過增(zeng)快(kuai)反應(ying)速度(du)、穩(wen)定復合物、防止非特異性(xing)沉淀等方式(shi)，顯(xian)著提高了免(mian)疫比濁法測定的靈敏度(du)和(he)準確(que)性(xing)。但在使(shi)用(yong)時需要嚴格控制PEG的濃度(du)和(he)操作條件(jian)，以避免(mian)不良影(ying)響。