我(wo)們(men)在(zai)發光試劑開發過程中，很大一部分就(jiu)是(shi)為了(le)試劑的(de)靈敏度而煩惱，還有就(jiu)是(shi)試劑的(de)穩定性(xing)，兩座(zuo)大山壓的(de)你喘不過氣(qi) ，今(jin)天就(jiu)和大家一起鏟平一座(zuo)山，剩下(xia)的(de)另一坐山我(wo)們(men)后(hou)面在(zai)探討，如有不對(dui)地方還請各(ge)位多(duo)多(duo)指教，同時(shi)也可以在(zai)留言處(chu)交流，相互學習進步!

化學發光試(shi)劑(ji)的(de)靈敏度(du)(du)直接影響到(dao)檢測(ce)結果的(de)準確性(xing)。如(ru)果試(shi)劑(ji)的(de)靈敏度(du)(du)不夠，可能(neng)會導(dao)致生臨床樣本的(de)漏檢或者(zhe)誤(wu)(wu)判，從而(er)延誤(wu)(wu)疾病的(de)治療(liao)或者(zhe)造成不必要的(de)醫療(liao)干預(yu)。如(ru)何提高試(shi)劑(ji)靈敏度(du)(du)，接下來(lai)我從這幾個方面進行歸納總結。

1.優化反應條件

一）溫度控制

這個原因大家都知道(dao)，但(dan)是(shi)也容易(yi)忽略，試(shi)(shi)劑反(fan)應(ying)的(de)(de)(de)速率(lv)(lv)和效率(lv)(lv)往往與溫(wen)(wen)度(du)密切(qie)相關(guan)，在較低(di)溫(wen)(wen)度(du)下，分(fen)子的(de)(de)(de)運動相對緩慢，反(fan)應(ying)的(de)(de)(de)活性較低(di)，化學發(fa)光試(shi)(shi)劑的(de)(de)(de)發(fa)光強(qiang)度(du)可能(neng)很微弱。隨著溫(wen)(wen)度(du)的(de)(de)(de)升(sheng)高(gao)，分(fen)子開始活躍起來，它們之(zhi)間的(de)(de)(de)碰撞頻率(lv)(lv)增加(jia)，反(fan)應(ying)逐漸(jian)加(jia)速，發(fa)光強(qiang)度(du)也開始增強(qiang)。然而(er)，如果溫(wen)(wen)度(du)過高(gao)，就像過度(du)熱情的(de)(de)(de)參與者容易(yi)失控一樣，反(fan)應(ying)可能(neng)會偏離正(zheng)常的(de)(de)(de)軌道(dao)，出現(xian)一些副(fu)反(fan)應(ying)或者導致發(fa)光試(shi)(shi)劑的(de)(de)(de)分(fen)解，從而(er)降低(di)發(fa)光效率(lv)(lv)。

二）pH調節

pH值(zhi)(zhi)的(de)(de)(de)(de)大小直接影響著反應(ying)體(ti)系(xi)中各種離(li)子的(de)(de)(de)(de)存在(zai)形(xing)式和(he)活性(xing)，進而(er)影響化(hua)學發(fa)(fa)光(guang)(guang)反應(ying)的(de)(de)(de)(de)進程。你對(dui)一種化(hua)學發(fa)(fa)光(guang)(guang)試(shi)(shi)劑(ji)進行pH值(zhi)(zhi)優化(hua)時，是不(bu)是需(xu)要先(xian)對(dui)該試(shi)(shi)劑(ji)原(yuan)料的(de)(de)(de)(de)化(hua)學結構和(he)反應(ying)機制有深(shen)入的(de)(de)(de)(de)了(le)解(jie)。例如，某些試(shi)(shi)劑(ji)可能在(zai)酸性(xing)環境下，其(qi)(qi)關鍵官能團會被(bei)質子化(hua)，從而(er)改變(bian)其(qi)(qi)反應(ying)活性(xing)，影響與(yu)其(qi)(qi)他反應(ying)物的(de)(de)(de)(de)結合能力(li)，導致發(fa)(fa)光(guang)(guang)強(qiang)度(du)降低。而(er)在(zai)堿(jian)性(xing)環境中，可能會發(fa)(fa)生(sheng)其(qi)(qi)他不(bu)利(li)于發(fa)(fa)光(guang)(guang)反應(ying)的(de)(de)(de)(de)變(bian)化(hua)，如某些離(li)子的(de)(de)(de)(de)沉淀或(huo)者反應(ying)物的(de)(de)(de)(de)分解(jie)。 

三）緩沖液選擇

我們知道(dao)，化(hua)學(xue)(xue)反(fan)(fan)(fan)(fan)(fan)應(ying)(ying)是(shi)(shi)(shi)一個動態的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)過(guo)程，在(zai)這個過(guo)程中(zhong)(zhong)，會產生或者消耗(hao)各種離(li)(li)(li)子(zi)(zi)，這些離(li)(li)(li)子(zi)(zi)濃(nong)(nong)度(du)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)變化(hua)可(ke)(ke)能會影響反(fan)(fan)(fan)(fan)(fan)應(ying)(ying)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)平衡和速(su)率。而緩(huan)沖(chong)(chong)(chong)液(ye)能夠通(tong)過(guo)自身的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)緩(huan)沖(chong)(chong)(chong)機制，調節離(li)(li)(li)子(zi)(zi)濃(nong)(nong)度(du)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)波動。例如，當反(fan)(fan)(fan)(fan)(fan)應(ying)(ying)產生酸性物(wu)質時(shi)(shi)，緩(huan)沖(chong)(chong)(chong)液(ye)中(zhong)(zhong)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)堿性成(cheng)(cheng)分會與(yu)之反(fan)(fan)(fan)(fan)(fan)應(ying)(ying)，中(zhong)(zhong)和酸性，防(fang)止pH值的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)急劇下降；反(fan)(fan)(fan)(fan)(fan)之，當反(fan)(fan)(fan)(fan)(fan)應(ying)(ying)產生堿性物(wu)質時(shi)(shi)，緩(huan)沖(chong)(chong)(chong)液(ye)中(zhong)(zhong)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)酸性成(cheng)(cheng)分會發揮作(zuo)用。選擇合適(shi)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)緩(huan)沖(chong)(chong)(chong)液(ye)并非易事，你需要考慮多(duo)個因(yin)素。首先是(shi)(shi)(shi)緩(huan)沖(chong)(chong)(chong)液(ye)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)緩(huan)沖(chong)(chong)(chong)范圍(wei)，它必須覆蓋化(hua)學(xue)(xue)發光反(fan)(fan)(fan)(fan)(fan)應(ying)(ying)所需要的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)pH值范圍(wei)。其(qi)次是(shi)(shi)(shi)緩(huan)沖(chong)(chong)(chong)液(ye)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)成(cheng)(cheng)分不能與(yu)化(hua)學(xue)(xue)發光試(shi)劑或者其(qi)他反(fan)(fan)(fan)(fan)(fan)應(ying)(ying)物(wu)發生化(hua)學(xue)(xue)反(fan)(fan)(fan)(fan)(fan)應(ying)(ying)，否則會干擾反(fan)(fan)(fan)(fan)(fan)應(ying)(ying)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)正常進行。此外，緩(huan)沖(chong)(chong)(chong)液(ye)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)離(li)(li)(li)子(zi)(zi)強度(du)也需要合適(shi)，過(guo)高的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)離(li)(li)(li)子(zi)(zi)強度(du)可(ke)(ke)能會影響反(fan)(fan)(fan)(fan)(fan)應(ying)(ying)物(wu)之間的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)相互作(zuo)用，而過(guo)低的(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)(de)離(li)(li)(li)子(zi)(zi)強度(du)可(ke)(ke)能無法有效地(di)穩定反(fan)(fan)(fan)(fan)(fan)應(ying)(ying)環境。

2.改進發光底物

一）選擇高效底物

不同的發光底物就像不同性能的演員，它們的發光效率有著顯著的差異。選擇具有更高發光效率的底物就像是挑選一位更出色的演員，能夠顯著提高整個檢測的靈敏度。以魯米諾（Luminol）為例，它是化學發光檢測領域的一位老牌“演員”，長期以來被廣泛應用。魯米諾具有一定的發光特性，在許多檢測中發揮著重要作用。然而，隨著科學技術的不斷發展，一些新型底物如過氧化氫酶（Hrp）底物開始嶄露頭角。這些新型底物就像是具有獨特技能的新演員，它們在發光效率方面展現出了卓越的性能。與魯米諾相比，它們可能具有更合理的化學結構，能夠在與其他反應物的相互作用中更高效地產生發光現象。例如，過氧化氫酶（Hrp）底物在特定的反應體系中，可能能夠更快速地與酶結合并轉化為發光狀態，而且發光的強度和持續時間都可能優于魯米諾。在這里建議小白在尋找更高效的發光底物時，需要對各種底物的化學結構、反應機制以及在不同體系中的性能進行深入的研究和比較。他們會在相同的反應條件下，分別測試不同底物的發光效率，觀察發光強度、發光起始時間、發光持續時間等多個指標，從而篩選出最適合特定檢測需求的高效底物。 

二）底物濃度優化

適當增加(jia)底(di)物濃度(du)，就像(xiang)是給(gei)反應注入了更多的“燃料(liao)”，在一(yi)定范(fan)圍(wei)內能夠提高發(fa)光(guang)強(qiang)度(du)。然(ran)而，這就像(xiang)烹(peng)飪(ren)一(yi)樣，食材（底(di)物）的量并(bing)不是越多越好。過高的底(di)物濃度(du)可能會引發(fa)一(yi)種類似(si)于“過度(du)烹(peng)飪(ren)”的現(xian)象——淬滅效應。 

 當我(wo)開始(shi)探索底(di)(di)(di)(di)(di)物(wu)(wu)(wu)(wu)(wu)濃(nong)(nong)(nong)度(du)(du)(du)對化學發(fa)光反應(ying)(ying)的(de)(de)(de)影響時，我(wo)會(hui)從較低的(de)(de)(de)底(di)(di)(di)(di)(di)物(wu)(wu)(wu)(wu)(wu)濃(nong)(nong)(nong)度(du)(du)(du)開始(shi)進行實驗(yan)。在低濃(nong)(nong)(nong)度(du)(du)(du)下(xia)(xia)，隨(sui)著底(di)(di)(di)(di)(di)物(wu)(wu)(wu)(wu)(wu)濃(nong)(nong)(nong)度(du)(du)(du)的(de)(de)(de)增(zeng)(zeng)加(jia)，反應(ying)(ying)體系(xi)中能(neng)夠(gou)(gou)參與發(fa)光反應(ying)(ying)的(de)(de)(de)底(di)(di)(di)(di)(di)物(wu)(wu)(wu)(wu)(wu)分子(zi)數量增(zeng)(zeng)多，發(fa)光強(qiang)度(du)(du)(du)會(hui)逐漸增(zeng)(zeng)強(qiang)。這是因為(wei)更多的(de)(de)(de)底(di)(di)(di)(di)(di)物(wu)(wu)(wu)(wu)(wu)分子(zi)有機會(hui)與其他反應(ying)(ying)物(wu)(wu)(wu)(wu)(wu)發(fa)生(sheng)反應(ying)(ying)，產(chan)生(sheng)更多的(de)(de)(de)發(fa)光產(chan)物(wu)(wu)(wu)(wu)(wu)。但是，當底(di)(di)(di)(di)(di)物(wu)(wu)(wu)(wu)(wu)濃(nong)(nong)(nong)度(du)(du)(du)達到一定(ding)程(cheng)度(du)(du)(du)后，情況就會(hui)發(fa)生(sheng)變化。過(guo)高的(de)(de)(de)底(di)(di)(di)(di)(di)物(wu)(wu)(wu)(wu)(wu)濃(nong)(nong)(nong)度(du)(du)(du)可(ke)能(neng)會(hui)導致底(di)(di)(di)(di)(di)物(wu)(wu)(wu)(wu)(wu)分子(zi)之間的(de)(de)(de)相互作(zuo)用過(guo)于(yu)復雜(za)，它們(men)可(ke)能(neng)會(hui)相互干擾(rao)，或者(zhe)與其他反應(ying)(ying)物(wu)(wu)(wu)(wu)(wu)形(xing)成不利于(yu)發(fa)光的(de)(de)(de)復合物(wu)(wu)(wu)(wu)(wu)。這種淬滅(mie)效應(ying)(ying)會(hui)使得發(fa)光強(qiang)度(du)(du)(du)不再隨(sui)著底(di)(di)(di)(di)(di)物(wu)(wu)(wu)(wu)(wu)濃(nong)(nong)(nong)度(du)(du)(du)的(de)(de)(de)增(zeng)(zeng)加(jia)而(er)增(zeng)(zeng)強(qiang)，反而(er)可(ke)能(neng)會(hui)下(xia)(xia)降(jiang)。所以(yi)，小白(bai)們(men)需要通過(guo)精心設(she)計實驗(yan)來確定(ding)最佳(jia)底(di)(di)(di)(di)(di)物(wu)(wu)(wu)(wu)(wu)濃(nong)(nong)(nong)度(du)(du)(du)。我(wo)會(hui)在一個較大的(de)(de)(de)底(di)(di)(di)(di)(di)物(wu)(wu)(wu)(wu)(wu)濃(nong)(nong)(nong)度(du)(du)(du)范圍內，設(she)置多個不同(tong)的(de)(de)(de)濃(nong)(nong)(nong)度(du)(du)(du)點，進行反應(ying)(ying)測(ce)試，繪制出(chu)發(fa)光強(qiang)度(du)(du)(du)與底(di)(di)(di)(di)(di)物(wu)(wu)(wu)(wu)(wu)濃(nong)(nong)(nong)度(du)(du)(du)之間的(de)(de)(de)關系(xi)曲線。通過(guo)對這個曲線的(de)(de)(de)分析(xi)，能(neng)夠(gou)(gou)準確地找(zhao)到那個既能(neng)保(bao)證足夠(gou)(gou)的(de)(de)(de)發(fa)光強(qiang)度(du)(du)(du)，又不會(hui)引發(fa)淬滅(mie)效應(ying)(ying)的(de)(de)(de)最佳(jia)底(di)(di)(di)(di)(di)物(wu)(wu)(wu)(wu)(wu)濃(nong)(nong)(nong)度(du)(du)(du)。 

3.增強信號放大

一）酶促放大

酶，這種生(sheng)物(wu)催(cui)化劑(ji)，具有獨特的能力，能夠在反(fan)應中顯著地(di)放(fang)大信號(hao)。例(li)如，辣根(gen)過(guo)氧化物(wu)酶（HRP）和(he)堿性磷酸(suan)酶（AP）就像(xiang)是兩位(wei)得力的“信號(hao)增(zeng)強助手”，經常被用(yong)于(yu)化學發光試(shi)劑(ji)中。  

以(yi)辣根過(guo)氧化(hua)(hua)物(wu)(wu)酶(mei)(mei)(mei)（HRP）為例(li)，它在(zai)特(te)定(ding)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)化(hua)(hua)學發光(guang)反(fan)應(ying)體系(xi)中，能夠(gou)(gou)催(cui)化(hua)(hua)底(di)(di)物(wu)(wu)發生(sheng)一系(xi)列的(de)(de)(de)(de)(de)(de)化(hua)(hua)學反(fan)應(ying)。這個(ge)過(guo)程(cheng)就像是一個(ge)連鎖反(fan)應(ying)，酶(mei)(mei)(mei)首先與底(di)(di)物(wu)(wu)結合，然后(hou)通(tong)過(guo)自身的(de)(de)(de)(de)(de)(de)催(cui)化(hua)(hua)活性(xing)，將底(di)(di)物(wu)(wu)轉化(hua)(hua)為一種具有(you)更高反(fan)應(ying)活性(xing)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)中間(jian)產(chan)(chan)物(wu)(wu)。這種中間(jian)產(chan)(chan)物(wu)(wu)又能夠(gou)(gou)進一步與其他反(fan)應(ying)物(wu)(wu)反(fan)應(ying)，生(sheng)成(cheng)更多的(de)(de)(de)(de)(de)(de)發光(guang)產(chan)(chan)物(wu)(wu)。每一個(ge)被(bei)酶(mei)(mei)(mei)催(cui)化(hua)(hua)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)底(di)(di)物(wu)(wu)分子都像是一顆種子，能夠(gou)(gou)引發一系(xi)列的(de)(de)(de)(de)(de)(de)反(fan)應(ying)，最終產(chan)(chan)生(sheng)大(da)量(liang)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)發光(guang)產(chan)(chan)物(wu)(wu)，從而顯著放(fang)大(da)了信(xin)號。堿性(xing)磷(lin)酸酶(mei)(mei)(mei)（AP）也有(you)著類(lei)似的(de)(de)(de)(de)(de)(de)功能。小白在(zai)利用(yong)酶(mei)(mei)(mei)促放(fang)大(da)信(xin)號時(shi)，需要(yao)對酶(mei)(mei)(mei)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)特(te)性(xing)有(you)深入的(de)(de)(de)(de)(de)(de)了解，你要(yao)知道酶(mei)(mei)(mei)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)最適反(fan)應(ying)條件，如溫度、pH值等，以(yi)確保酶(mei)(mei)(mei)能夠(gou)(gou)發揮出最佳(jia)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)催(cui)化(hua)(hua)活性(xing)。同(tong)時(shi)，你還需要(yao)精(jing)確控(kong)制酶(mei)(mei)(mei)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)用(yong)量(liang)，因(yin)為酶(mei)(mei)(mei)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)用(yong)量(liang)過(guo)少可(ke)(ke)能無法達到有(you)效的(de)(de)(de)(de)(de)(de)信(xin)號放(fang)大(da)效果，而酶(mei)(mei)(mei)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)用(yong)量(liang)過(guo)多可(ke)(ke)能會導致不必要(yao)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)成(cheng)本增加，甚至可(ke)(ke)能會引發一些(xie)副反(fan)應(ying)。 

二）納米材料

這個有點遠！量子點是一種納米級別的半導體材料，它具有尺寸小、量子產率高、熒光發射光譜窄等優點。量子點會吸附在某些反應物的表面，改變它們的電子結構或者反應活性，從而促進發光反應的進行。而且，量子點自身的光學性質使得它能夠吸收和重新發射光子，這一過程可以有效地增強發光信號。金納米顆粒也有著獨特的作用。金納米顆粒具有良好的生物相容性和表面等離子體共振效應。當金納米顆粒存在于化學發光反應體系中時，它可以通過表面等離子體共振效應增強局部的電磁場，從而提高發光試劑的激發效率，使得發光強度增加。小白你在將納米材料應用于化學發光檢測時，你需要注意的是，如何確保納米材料在反應體系中的均勻分散，避免團聚現象的發生，因為團聚可能會影響納米材料的性能。同時，他們還需要研究納米材料與其他反應物之間的相互作用機制，以便更好地發揮納米材料的信號放大作用。 

三）生物素 - 親和素系統

在(zai)(zai)這個(ge)(ge)系統(tong)中(zhong)，生(sheng)物(wu)(wu)素(su)(su)可(ke)以與(yu)各種生(sheng)物(wu)(wu)分(fen)子(zi)(zi)(zi)，如(ru)抗(kang)體(ti)、酶等(deng)進行(xing)共(gong)價結合(he)。而親(qin)(qin)(qin)(qin)和(he)素(su)(su)具(ju)有四(si)個(ge)(ge)相同(tong)的(de)(de)亞(ya)基，每個(ge)(ge)亞(ya)基都(dou)能(neng)夠與(yu)生(sheng)物(wu)(wu)素(su)(su)特異性結合(he)。這就意味著(zhu)一個(ge)(ge)親(qin)(qin)(qin)(qin)和(he)素(su)(su)分(fen)子(zi)(zi)(zi)可(ke)以同(tong)時結合(he)四(si)個(ge)(ge)生(sheng)物(wu)(wu)素(su)(su)分(fen)子(zi)(zi)(zi)。當將(jiang)這個(ge)(ge)系統(tong)應用于化學(xue)發光檢(jian)測時，可(ke)以通過(guo)巧妙的(de)(de)設計來(lai)實現(xian)信號(hao)(hao)(hao)放大(da)。例如(ru)，你(ni)可(ke)以先(xian)將(jiang)生(sheng)物(wu)(wu)素(su)(su)標記在(zai)(zai)化學(xue)發光試劑或(huo)者(zhe)檢(jian)測探針(zhen)上，然后加(jia)入(ru)親(qin)(qin)(qin)(qin)和(he)素(su)(su)。由(you)于親(qin)(qin)(qin)(qin)和(he)素(su)(su)與(yu)生(sheng)物(wu)(wu)素(su)(su)的(de)(de)高親(qin)(qin)(qin)(qin)和(he)力(li)，它們會(hui)迅速結合(he)。接著(zhu)，可(ke)以再加(jia)入(ru)生(sheng)物(wu)(wu)素(su)(su)標記的(de)(de)信號(hao)(hao)(hao)放大(da)分(fen)子(zi)(zi)(zi)，如(ru)酶或(huo)者(zhe)納米材(cai)料等(deng)。這些生(sheng)物(wu)(wu)素(su)(su)標記的(de)(de)信號(hao)(hao)(hao)放大(da)分(fen)子(zi)(zi)(zi)又可(ke)以與(yu)親(qin)(qin)(qin)(qin)和(he)素(su)(su)上未(wei)結合(he)生(sheng)物(wu)(wu)素(su)(su)的(de)(de)亞(ya)基結合(he)。這樣(yang)，通過(guo)一級又一級的(de)(de)結合(he)，就能(neng)夠將(jiang)信號(hao)(hao)(hao)不斷(duan)放大(da)。小白你(ni)在(zai)(zai)利用生(sheng)物(wu)(wu)素(su)(su) - 親(qin)(qin)(qin)(qin)和(he)素(su)(su)系統(tong)時，需要精確(que)控(kong)制各個(ge)(ge)組分(fen)的(de)(de)濃(nong)度和(he)加(jia)入(ru)順序(xu)。如(ru)果(guo)生(sheng)物(wu)(wu)素(su)(su)或(huo)者(zhe)親(qin)(qin)(qin)(qin)和(he)素(su)(su)的(de)(de)濃(nong)度過(guo)高或(huo)過(guo)低，都(dou)可(ke)能(neng)會(hui)影響信號(hao)(hao)(hao)放大(da)的(de)(de)效(xiao)果(guo)。而且，加(jia)入(ru)順序(xu)錯誤可(ke)能(neng)會(hui)導致反應無法(fa)按照(zhao)預期進行(xing)，無法(fa)實現(xian)有效(xiao)的(de)(de)信號(hao)(hao)(hao)放大(da)。 

4.減少背景信號

一）去除干擾物質

樣(yang)品(pin)中的(de)(de)蛋(dan)白(bai)質、脂質等物質就是常(chang)(chang)見的(de)(de)干(gan)擾(rao)(rao)物質，它們(men)可(ke)能(neng)會(hui)(hui)與(yu)化學發(fa)(fa)光(guang)(guang)試劑或者其他反應物發(fa)(fa)生(sheng)非特異(yi)性結合(he)，從而產生(sheng)額外的(de)(de)發(fa)(fa)光(guang)(guang)信號或者干(gan)擾(rao)(rao)正常(chang)(chang)的(de)(de)發(fa)(fa)光(guang)(guang)信號。因此，通過預(yu)處理樣(yang)品(pin)，去(qu)除(chu)這些可(ke)能(neng)干(gan)擾(rao)(rao)發(fa)(fa)光(guang)(guang)信號的(de)(de)物質就顯得尤為重要。對于蛋(dan)白(bai)質的(de)(de)去(qu)除(chu)，可(ke)以采(cai)用(yong)多種(zhong)(zhong)方法(fa)。例(li)如，鹽析法(fa)是一種(zhong)(zhong)常(chang)(chang)用(yong)的(de)(de)方法(fa)。通過向樣(yang)品(pin)中加入適量(liang)的(de)(de)鹽，如硫酸(suan)銨(an)，蛋(dan)白(bai)質的(de)(de)溶(rong)解度會(hui)(hui)降低，從而沉淀出(chu)來。這種(zhong)(zhong)方法(fa)相對簡單易行，但可(ke)能(neng)會(hui)(hui)對樣(yang)品(pin)中的(de)(de)其他成(cheng)分產生(sheng)一定的(de)(de)影響。。 

二）特異性原料

在(zai)化(hua)學發(fa)光檢測(ce)中，使用特異(yi)(yi)(yi)性(xing)更(geng)強的(de)(de)抗(kang)(kang)體或探(tan)針就像是派出精(jing)準的(de)(de)偵察兵，能(neng)夠減少非特異(yi)(yi)(yi)性(xing)結(jie)合(he)，從而(er)降低背景信號。特異(yi)(yi)(yi)性(xing)是衡量抗(kang)(kang)體或探(tan)針性(xing)能(neng)的(de)(de)一(yi)個重要指(zhi)標(biao)(biao)(biao)。當檢測(ce)目(mu)標(biao)(biao)(biao)是一(yi)種(zhong)特定的(de)(de)生物(wu)標(biao)(biao)(biao)志(zhi)物(wu)時(shi)，特異(yi)(yi)(yi)性(xing)抗(kang)(kang)體能(neng)夠精(jing)準地識(shi)別(bie)并結(jie)合(he)目(mu)標(biao)(biao)(biao)生物(wu)標(biao)(biao)(biao)志(zhi)物(wu)，而(er)盡量避免與(yu)其(qi)他非目(mu)標(biao)(biao)(biao)物(wu)質結(jie)合(he)。例如(ru)，在(zai)檢測(ce)某種(zhong)疾病相關的(de)(de)蛋(dan)白質標(biao)(biao)(biao)志(zhi)物(wu)時(shi)，一(yi)種(zhong)高特異(yi)(yi)(yi)性(xing)的(de)(de)抗(kang)(kang)體能(neng)夠準確地識(shi)別(bie)這(zhe)種(zhong)蛋(dan)白質的(de)(de)特定結(jie)構(gou)(gou)域，而(er)不會與(yu)樣品中其(qi)他類(lei)似結(jie)構(gou)(gou)的(de)(de)蛋(dan)白質發(fa)生交叉反應。

三）優化洗滌步驟

在(zai)化學(xue)發光檢(jian)(jian)測(ce)過(guo)程(cheng)中，洗(xi)滌(di)步驟就像是(shi)一場細致的(de)(de)(de)大掃除(chu)，通(tong)過(guo)多(duo)次洗(xi)滌(di)去(qu)除(chu)未(wei)結(jie)合的(de)(de)(de)標(biao)(biao)(biao)記(ji)(ji)(ji)物(wu)(wu)(wu)，減少背景信號(hao)。在(zai)進行化學(xue)發光檢(jian)(jian)測(ce)時，通(tong)常會(hui)使用(yong)標(biao)(biao)(biao)記(ji)(ji)(ji)物(wu)(wu)(wu)來標(biao)(biao)(biao)記(ji)(ji)(ji)檢(jian)(jian)測(ce)試(shi)劑或(huo)者目(mu)(mu)標(biao)(biao)(biao)分(fen)子(zi)。然而(er)，在(zai)反應結(jie)束后，可(ke)(ke)能(neng)會(hui)有(you)一些未(wei)結(jie)合的(de)(de)(de)標(biao)(biao)(biao)記(ji)(ji)(ji)物(wu)(wu)(wu)殘留(liu)在(zai)體系中，這些未(wei)結(jie)合的(de)(de)(de)標(biao)(biao)(biao)記(ji)(ji)(ji)物(wu)(wu)(wu)可(ke)(ke)能(neng)會(hui)產(chan)生額外的(de)(de)(de)發光信號(hao)，從而(er)增(zeng)加背景信號(hao)。因(yin)此，需(xu)要通(tong)過(guo)洗(xi)滌(di)步驟將它們去(qu)除(chu)。洗(xi)滌(di)過(guo)程(cheng)需(xu)要注意多(duo)個方面(mian)。首先是(shi)洗(xi)滌(di)液(ye)的(de)(de)(de)選擇(ze)，洗(xi)滌(di)液(ye)需(xu)要能(neng)夠有(you)效地溶解未(wei)結(jie)合的(de)(de)(de)標(biao)(biao)(biao)記(ji)(ji)(ji)物(wu)(wu)(wu)，同(tong)時又不會(hui)對(dui)已經結(jie)合的(de)(de)(de)標(biao)(biao)(biao)記(ji)(ji)(ji)物(wu)(wu)(wu)或(huo)者目(mu)(mu)標(biao)(biao)(biao)分(fen)子(zi)產(chan)生影響。例如(ru)，可(ke)(ke)以使用(yong)含有(you)一定濃度的(de)(de)(de)緩沖鹽(yan)和表面(mian)活性劑的(de)(de)(de)洗(xi)滌(di)液(ye)。其次是(shi)洗(xi)滌(di)的(de)(de)(de)次數(shu)和時間(jian)(jian)，洗(xi)滌(di)次數(shu)過(guo)少或(huo)者時間(jian)(jian)過(guo)短可(ke)(ke)能(neng)無法(fa)徹底去(qu)除(chu)未(wei)結(jie)合的(de)(de)(de)標(biao)(biao)(biao)記(ji)(ji)(ji)物(wu)(wu)(wu)，而(er)洗(xi)滌(di)次數(shu)過(guo)多(duo)或(huo)者時間(jian)(jian)過(guo)長可(ke)(ke)能(neng)會(hui)導致已經結(jie)合的(de)(de)(de)標(biao)(biao)(biao)記(ji)(ji)(ji)物(wu)(wu)(wu)脫落(luo)。