1.定性檢測體外檢測試劑

1.1檢出限

一般采用(yong)檢出限(xian)（Limit of Detection, LoD）指(zhi)標來體現注冊申報產品的(de)檢出能力。檢出限(xian)的(de)研究，應采用(yong)多批試(shi)劑，多個樣本(ben)進行，且研究應持續多天。

可給出連續量(liang)值(zhi)信(xin)號的定(ding)(ding)性檢測(ce)試(shi)(shi)劑(ji)，如基于酶聯免疫吸附(fu)技術的檢測(ce)試(shi)(shi)劑(ji)采用(yong)吸光度響應區別“有反應”和“無反應”結果。對(dui)于此類檢測(ce)，可參(can)考《定(ding)(ding)量(liang)檢測(ce)試(shi)(shi)劑(ji)分(fen)析性能評估注(zhu)(zhu)冊技術審查指導原則》中相關內容(rong)，設定(ding)(ding)空白限(xian)和LoD。注(zhu)(zhu)意：這不適用(yong)于臨界值(zhi)遠高于檢出限(xian)的檢出項目。

1.2LOD的建立

建議采(cai)用(yong)對已(yi)知(zhi)分(fen)析(xi)(xi)物濃(nong)(nong)度(du)的(de)(de)(de)樣本進行系列稀釋(shi)后重(zhong)復(fu)檢測的(de)(de)(de)方法，確定申報試劑(ji)(ji)的(de)(de)(de)檢出(chu)(chu)限(xian)。在上述重(zhong)復(fu)檢測過程中，記錄不同稀釋(shi)度(du)/濃(nong)(nong)度(du)檢出(chu)(chu)（或陽性）的(de)(de)(de)結果。采(cai)用(yong)適當的(de)(de)(de)模(mo)型(xing)（如Probit分(fen)析(xi)(xi)）和分(fen)析(xi)(xi)方法，計算(suan)申報試劑(ji)(ji)在設定概率下(xia)的(de)(de)(de)檢出(chu)(chu)限(xian)，一般(ban)在該檢測濃(nong)(nong)度(du)下(xia)應具有95%的(de)(de)(de)陽性檢出(chu)(chu)率。

染色(se)體檢測試(shi)劑，需(xu)要考慮(lv)不同(tong)嵌合比例的(de)檢出情況（如適用）。

線粒體突變(bian)檢測試(shi)劑和腫瘤基因突變(bian)檢測試(shi)劑，應考慮特定核酸濃度下，不(bu)同突變(bian)比(bi)例檢出情(qing)況下的LOD（如(ru)適(shi)用）。

病原體(ti)檢測試劑(ji)，應(ying)納入代表性型(xing)別(bie)(bie)(bie)，分(fen)別(bie)(bie)(bie)計算每個型(xing)別(bie)(bie)(bie)的(de)LoD，并取最大值作為整個檢測試劑(ji)的(de)LOD，或分(fen)別(bie)(bie)(bie)聲稱不同型(xing)別(bie)(bie)(bie)的(de)LOD。對于(yu)罕見(jian)的(de)型(xing)別(bie)(bie)(bie)，可(ke)在(zai)后續的(de)檢出限驗證(zheng)試驗中進(jin)行確(que)認。

人(ren)類基因突變（胚(pei)系突變）或基因多態性檢測試劑(ji)，應包含對(dui)型別為雜合子的樣(yang)本進行LOD（核酸(suan)濃度）研究。

1.2LOD的驗證

注冊申報產(chan)品應在檢(jian)測限(xian)濃度(du)水平對常見分析物型別進行驗(yan)證，一般采用對檢(jian)出限(xian)濃度(du)水平樣本進行至少(shao)20次的重復(fu)試驗(yan)的方(fang)法(fa)(fa)對LOD進行驗(yan)證。申請(qing)人應明確檢(jian)出限(xian)驗(yan)證中，各(ge)個樣本的來源、型別及(ji)濃度(du)確認的方(fang)法(fa)(fa)信息(xi)。

2.定量檢測體外檢測試劑

2.1空白(bai)限、檢出(chu)限及定量限

定量檢測(ce)體外診斷(duan)試劑對樣本濃度(du)下限的(de)檢出能力指標包(bao)括空(kong)白限（LoB）、檢出限（LoD）及定量限（LoQ）。申請人應根(gen)據產品的(de)具體情況(kuang)選擇適(shi)用(yong)的(de)方(fang)法進行檢出能力的(de)研(yan)究，如產品不適(shi)用(yong)于LoB、LoD和LoQ的(de)概念，應提供(gong)充分說明。

2.2空白限、檢出限及定量限的建立

LoB，LoD，LoQ的(de)建立需分(fen)別選擇多(duo)個獨立的(de)樣(yang)本(ben)(ben)（空白樣(yang)本(ben)(ben)、低濃(nong)度水(shui)平樣(yang)本(ben)(ben)、已知濃(nong)度的(de)低水(shui)平樣(yang)本(ben)(ben)），在多(duo)天內進行研究。

LoB一般由多個(ge)獨(du)(du)立的(de)(de)(de)空(kong)(kong)白(bai)樣(yang)(yang)本（無分(fen)(fen)析物）的(de)(de)(de)檢(jian)(jian)測(ce)結(jie)果計(ji)算獲(huo)得；LoD一般由多個(ge)獨(du)(du)立的(de)(de)(de)低濃度(du)（含(han)有(you)分(fen)(fen)析物）樣(yang)(yang)本的(de)(de)(de)檢(jian)(jian)測(ce)結(jie)果，結(jie)合(he)LoB進(jin)行(xing)計(ji)算獲(huo)得。應根據具體產品(pin)的(de)(de)(de)原(yuan)理(li)、檢(jian)(jian)測(ce)結(jie)果差(cha)異和(he)數據分(fen)(fen)布，選(xuan)擇合(he)理(li)的(de)(de)(de)試(shi)驗方(fang)案和(he)統計(ji)分(fen)(fen)析方(fang)法。對于(yu)空(kong)(kong)白(bai)樣(yang)(yang)本檢(jian)(jian)測(ce)結(jie)果為(wei)陰性或零(ling)，LoD濃度(du)樣(yang)(yang)本在(zai)預設概率下（例如(ru)95%）檢(jian)(jian)測(ce)結(jie)果為(wei)陽性的(de)(de)(de)試(shi)劑(ji)，可(ke)采用(yong)對多個(ge)已知(zhi)分(fen)(fen)析物濃度(du)的(de)(de)(de)樣(yang)(yang)本進(jin)行(xing)系列稀釋后重復檢(jian)(jian)測(ce)獲(huo)得LoD，例如(ru)病原(yuan)體核(he)酸檢(jian)(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)，采用(yong)95%陽性檢(jian)(jian)出率作為(wei)其LoD。對于(yu)分(fen)(fen)析物包括(kuo)不同(tong)型(xing)別的(de)(de)(de)檢(jian)(jian)測(ce)試(shi)劑(ji)，應納(na)入所有(you)代表型(xing)別的(de)(de)(de)樣(yang)(yang)本，分(fen)(fen)別計(ji)算各型(xing)別的(de)(de)(de)LoD，取(qu)最(zui)大值作為(wei)申報(bao)試(shi)劑(ji)的(de)(de)(de)LoD。罕(han)見型(xing)別可(ke)在(zai)LoD建立過程中(zhong)評估，亦(yi)可(ke)在(zai)驗證過程中(zhong)進(jin)行(xing)確認。

LoQ應滿(man)足(zu)預設準(zhun)確度(du)指標，即考慮偏倚和精密(mi)度(du)的要(yao)求。偏倚可(ke)通過檢測(ce)具有可(ke)接受(shou)參考量值的樣(yang)本(ben)(ben)進(jin)行(xing)評估，所(suo)以需獲得已知濃度(du)的低水平樣(yang)本(ben)(ben)，例如本(ben)(ben)文（二(er)）1.1中所(suo)述參(can)考(kao)物質。如涉及將樣(yang)本(ben)(ben)稀(xi)釋(shi)至低濃度(du)水平，應(ying)確保(bao)稀(xi)釋(shi)液不引起明(ming)顯(xian)的基質效應，且在低(di)濃度(du)區間呈線性。精(jing)密度(du)的(de)(de)評估可根據檢測(ce)試劑(ji)及其(qi)(qi)(qi)應(ying)(ying)用確定(ding)其(qi)(qi)(qi)測(ce)量條件(jian)，一般應(ying)(ying)至少(shao)包括重復性和日間精(jing)密度(du)。在某(mou)些情(qing)況下，如(ru)無法(fa)在合(he)適(shi)的(de)(de)低(di)水平分析(xi)物濃度(du)下確定(ding)偏倚，可采用其(qi)(qi)(qi)他(ta)合(he)理的(de)(de)替代(dai)方(fang)法(fa)評估LoQ，例如(ru)研究試劑(ji)精(jing)密度(du)達到特定(ding)要(yao)求時的(de)(de)最低(di)分析(xi)物濃度(du)。建議僅(jin)在無法(fa)確定(ding)偏倚時采用替代(dai)方(fang)法(fa)，并且應(ying)(ying)設置(zhi)較(jiao)為嚴格(ge)的(de)(de)精(jing)密度(du)要(yao)求。

2.3空白限、檢出限及定量限的驗證

LoB，LoD，LoQ的驗證(zheng)需各選擇(ze)至少(shao)2個樣本(ben)（空白樣本(ben)、檢(jian)出(chu)限濃度樣本(ben)、定量限濃度樣本(ben)），在多天內進行試驗。每個試劑批次至少(shao)需要(yao)獲得20個檢(jian)測(ce)結果(guo)，計算(suan)符合要(yao)求(qiu)的檢(jian)測(ce)結果(guo)比(bi)例，如果(guo)比(bi)例符合統(tong)計學要(yao)求(qiu)/預設(she)的臨界值，則4.1建立的LoB，LoD，LoQ得到驗證(zheng)。一般(ban)來講(jiang)，LoB總是低于(yu)(yu)LoD，而LoD則低于(yu)(yu)或等(deng)于(yu)(yu)LoQ。