體外診斷(duan)(duan)試(shi)劑是疾病診斷(duan)(duan)與治(zhi)療的(de)重要輔助手(shou)段。一個新(xin)開發的(de)試(shi)劑能否真正面市，除了進行反應模式和體系等優化(hua)外，合(he)理的(de)性(xing)(xing)能分析與評估(gu)，是必經的(de)程序(xu)，也是質量保障的(de)基礎。通(tong)常(chang)，體外診斷(duan)(duan)試(shi)劑產品性(xing)(xing)能評估(gu)包括檢測(ce)限、線性(xing)(xing)范(fan)圍、可報告范(fan)圍，準確度，精密(mi)度，干擾實驗，穩定性(xing)(xing)，參考區(qu)間。

1.檢測限

檢測限是(shi)指檢測方(fang)法(fa)可(ke)檢測出的最低被檢測量濃度(du)，也(ye)稱為(wei)分析靈敏度(du)。

分析靈敏度：一般用95％可信限計算：重復測定空白樣本20次，計算20次反應測得的均值（X）和標準差（SD），以X+2SD（夾心法）或X-2SD（競爭法）計算出相應的濃度，即為體外診斷試劑的分析靈敏度，也是注冊資料所需提供的內容。

功能靈敏度：將低(di)值(zhi)樣(yang)本倍比稀(xi)釋后重(zhong)復測定10次以上，計算每個低(di)值(zhi)樣(yang)本檢(jian)測信號(hao)的均值(zhi)、標準差和(he)變異系數（CV），選擇(ze)CV大于 20％時(shi)所對(dui)應的(de)低值樣本平(ping)均(jun)濃度，這就是體外診斷試劑的(de)功能靈敏度。

2.線性范圍

線性范(fan)圍是指檢測系統最終輸出(chu)值（濃(nong)度或活性）與(yu)被(bei)分析物的(de)濃(nong)度成正比(bi)的(de)范(fan)圍。

建立一種定量(liang)測(ce)定方法的(de)線(xian)性范(fan)圍(wei)，需(xu)在預期測(ce)定范(fan)圍(wei)內選擇(ze)7-11個濃(nong)度水平(ping)。準備足量(liang)的(de)高(gao)值(zhi)（H）樣(yang)本和低(di)值(zhi)（L）樣(yang)本，經不同(tong)比例混合(he)配制成中間濃(nong)度樣(yang)本，比例關系可按等間距或其他確定的(de)比例。其中，有幾個重要的(de)濃(nong)度水平(ping)需(xu)要考慮：1）最(zui)低(di)分析濃(nong)度或線(xian)性范(fan)圍(wei)下限；2）不同(tong)的(de)醫學決定水平(ping)值(zhi)；3）最(zui)高(gao)分析濃(nong)度或線(xian)性范(fan)圍(wei)上(shang)限。

3.可報告范圍

可報告范圍(wei)是指(zhi)對檢(jian)測有意義的待測物濃度范圍(wei)。

可報告范圍低限：以方法性能指示的CV值為可接受界值，由數據中選取CV值等于或小于可接受界值的最低濃度水平作為可報告范圍低限。

可報告范圍高限：當測定(ding)值超(chao)出線性范圍上限時，此測定(ding)值應視為不準確值，需要對(dui)標本進行(xing)稀釋。由于基質效應的(de)影響，任何標本并非(fei)可(ke)以做無(wu)止(zhi)境的(de)稀(xi)(xi)釋。也就(jiu)是說，每一(yi)個實驗(yan)項目有其最大稀(xi)(xi)釋倍數。這個最大稀(xi)(xi)釋倍數與線性范圍上限的(de)乘積即(ji)為可(ke)報告范圍高限。

4.準確度

準確度(du)是指(zhi)檢(jian)測(ce)(ce)結果(guo)與被測(ce)(ce)量真值之間的一(yi)致(zhi)程度(du)。

回收實驗：實(shi)質上是實(shi)驗(yan)測得的(de)(de)加入的(de)(de)標準物(wu)的(de)(de)濃度與(yu)理論計算而來的(de)(de)加入標準物(wu)的(de)(de)濃度的(de)(de)比值。

方法學比對：對(dui)于比(bi)較、比(bi)對(dui)方(fang)法(fa)(fa)，采用符合生產廠家要求的(de)實驗(yan)室現(xian)行方(fang)法(fa)(fa)，或采用工人的(de)參考方(fang)法(fa)(fa)。比(bi)對(dui)方(fang)法(fa)(fa)應(ying)具備以上(shang)條件(jian)：1）具有(you)比(bi)實驗(yan)樣(yang)品(pin)方(fang)法(fa)(fa)更好(hao)的(de)精(jing)密度；2）沒有(you)已知的(de)干擾物；3）同實驗(yan)樣(yang)品(pin)方(fang)法(fa)(fa)具有(you)相同單位。

5.精密度

精密(mi)度(du)(du)通(tong)常(chang)是指在規(gui)定條件下相互獨(du)立的(de)測試結果之間的(de)一致程度(du)(du)。精密(mi)度(du)(du)的(de)程度(du)(du)是用統計學方法得(de)到的(de)，是通(tong)過測量不精密度的(de)數(shu)(shu)字(zi)形(xing)式(shi)表示(shi)的(de)，例如(ru)：偏差、標(biao)準(zhun)差和變(bian)異系數(shu)(shu)（CV）。

只評估批內精密度：批內精密度(du)的(de)(de)測定(ding)應使用(yong)同一(yi)種類、同一(yi)批號的(de)(de)試劑盒校準物（如可(ke)能，只(zhi)進行一次(ci)(ci)校準），在一批內對樣本進行至少20次(ci)(ci)重復測定。

同時評估批內和批間精密度：每天做2個批次的測試，每批測試對同一樣品做雙份測量，工作20d。那么，評估結束時有40對數據，即80個測試結果。從同一樣本的雙份測量結果即40個數據可求出批內精密度；從兩批80個數據可求出批間精密度。

6.干擾實驗

干擾(rao)實驗主要是(shi)考(kao)慮非(fei)檢(jian)測(ce)物(wu)對檢(jian)測(ce)結(jie)果的(de)(de)影響(xiang)，通(tong)過對樣(yang)本(ben)中添(tian)加不同種類、不同濃度(du)的(de)(de)干擾(rao)物(wu)質(zhi)進(jin)行檢(jian)測(ce)，以(yi)判(pan)斷在產(chan)品(pin)性能指標范圍內可接受的(de)(de)干擾(rao)物(wu)質(zhi)極限濃度(du)。血液樣(yang)本(ben)一(yi)(yi)般(ban)須考(kao)慮膽(dan)紅(hong)素、血紅(hong)蛋白、甘油三酯等常見干擾(rao)物(wu)質(zhi)及溶血等因(yin)素；檢(jian)測(ce)樣(yang)本(ben)為血漿的(de)(de)試劑，還應(ying)充分考(kao)慮不同抗凝劑對檢(jian)測(ce)結(jie)果的(de)(de)影響(xiang)。尿液樣(yang)本(ben)則一(yi)(yi)般(ban)考(kao)慮pH值、血尿、蛋白尿等的影(ying)響(xiang)。

7.穩定性

穩定性是體外診斷試劑(ji)隨時間(jian)推移保持特(te)性一致性的(de)能力。

效期穩定性研究時間：設定一般原則是“第一年內每隔三個月檢測一次，第二年內每隔六個月檢測一次，第三年開始可以每年檢測一次。如果有效期為一年或一年以內，則長期穩定性應為前三個月每月檢測一次，以后每三個月一次”。

加速穩定性研究方法為：將三個批號的試劑盒放 入37?C恒溫培養箱中，分別于第0、3、6、10天各取原裝未開封試劑，參考產品技術要求中相關檢測方法對產品進行檢測，各指標均應符合擬定的技術要求中各性能指標要求。

運輸穩定性評價：是基于對試劑實際運輸條件的了解（如運輸時間、預計溫度和濕度）來模擬運輸條件存放產品從而評價產品的穩定性。在運輸穩定性考察中主要考慮的條件有：極端溫度條件，溫度循環條件，沖擊與振蕩，壓力與濕度等。生產企業可以通過實地追蹤記錄體外診斷試劑產品的物流運輸情況為模擬運輸 模式的確定提供參考。

開瓶穩定性：是考察試劑在正常使用條件下，外界因素對試劑性能指標的影響。由于試劑、試紙條等在開封后會 與空氣接觸產生氧化、降解等反應，部分試劑在開瓶上機后的外界條件與原儲存條件差別很大，以及部分試劑還會存在使用者二次配制等情況，所以在制定開封穩定性研究方法時應充分考慮到各種環境因素。

8.參考區間

參(can)考區(qu)間(jian)即正常人群的(de)(de)(de)檢測值范圍，在(zai)研(yan)究(jiu)過(guo)程(cheng)(cheng)中，企業(ye)應詳(xiang)細說明(ming)所(suo)采(cai)用樣本來源及試驗方(fang)法，并(bing)明(ming)確(que)參(can)考人群的(de)(de)(de)篩選標準。根(gen)據文獻資料(liao)等判(pan)斷檢測結(jie)果在(zai)不同(tong)性別(bie)、年齡、樣本類型之問是否有顯著(zhu)性差異(yi)，如(ru)有須分別(bie)進行研(yan)究(jiu)，同(tong)時(shi)所(suo)研(yan)究(jiu)樣本例數應符合(he)統計學要求(qiu)，建議(yi)采(cai)用至少120例以上樣本進行研(yan)究(jiu)(可滿足(zu)90％置信(xin)限)，198例樣本則可滿足(zu)99％的(de)(de)(de)置信(xin)限，在(zai)檢測結(jie)果統計分析過(guo)程(cheng)(cheng)中，結(jie)合(he)不同(tong)產品(pin)的(de)(de)(de)臨床意義確(que)定最終的(de)(de)(de)參(can)考區(qu)間(jian)，在(zai)研(yan)究(jiu)過(guo)程(cheng)(cheng)中由(you)于所(suo)選樣本受地區(qu)或人種限制(zhi)，因此在(zai)臨床應用時(shi)建議(yi)各臨床實(shi)驗室建立參(can)考區(qu)間(jian)。